Método de Biureto para construção da curva padrão e quantificação proteica

 

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Para quantificar as proteínas, foi utilizado o método de Biureto conforme o protocolo do fabricante. Resumidamente, 7 tubos de 15 mL foram utilizados para preparar o branco, 4 amostras standards e 2 tubos com mioglobulina previamente preparados, todos os tubos tiveram os reagentes acrescentados. Após incubação a 37 °C/ 30 min, alíquotas de 1 mL foram transferidas para cuvetes e lidas no espectrofotómetro (Abs 540 nm). 

Este protocolo foi desenvolvido e realizado no Laboratórios de Biologia Molecular e Celular/47409 da Universidade de Aveiro

E para que quantificar proteínas?

As proteínas podem ser quantificadas por vários motivos: para ver a pureza e qualidade das moléculas ou para saber a quantidade exata que se irá utilizar, por exemplo, num teste de sensibilidade microbiológica, onde as diluições são seriadas e se o seu bioproduto for uma proteína, você precisará saber a quantidade de proteína inicial e as quantidades diluídas, para posteriormente analisar os seus resultados.