Protocolo de Real time PCR
Created in BioRender. Dallavecchia, D.L (2025) https://BioRender.com/z53a801A quantificação foi realizada com NZYSupremeqPCR Green Master Mix (NZYTech, Portugal), contendo enzima hot-start e tampões otimizados. Uma amostra de DNA ambiental de planta foi fornecida, já diluída (1:10). O mix foi preparado com 10 µL de master mix, 6,4 µL de água estéril, 0,8 µL de primer forward, 0,8 µL de primer reverse e 1 µL de DNA. As condições de qPCR no termociclador foram: 95 °C por 3 min (inicial), seguido de 40 ciclos de 95 °C por 5 seg e 60 °C por 15seg. Os resultados foram analisados em tempo real no software do termociclador.
Este protocolo foi desenvolvido e realizado no Laboratórios de Biologia Molecular e Celular/47409 da Universidade de Aveiro
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